微生物知识手册介绍
1 基础知识
1.1 揭开微生物的“食堂”——培养基到底是什么?
1.2 一份培养基里都有哪些“食材”?——四大核心成分
1.3 硬邦邦 vs 稀溜溜——固体、液体、半固体培养基的区别
1.4 一眼认出细菌“颜色”——鉴别培养基与显色培养基原理
1.5 如何“拦住”不想长的菌——选择性培养基的秘密
1.6 历史上第一碗“细菌汤”——巴斯德与肉汤培养基
1.7 科赫的大发明——如何让细菌“定住”便于观察
1.8 培养基的pH值——差0.1可能就养不出来
1.9 干粉 vs 即用型——该买哪一种?
1.10 长了菌的平板千万别直接扔——培养基废弃物安全处理
1.11 中国医学微生物菌种保藏管理办法
1.12 金黄色葡萄球菌的检测方法
1.13 微生物培养基基础知识:培养基分类与常用术语详解
1.14 实验室技术——生物安全柜的正确使用方法与注意事项
1.15 细菌基因突变的类型和机制:从碱基变化到转位因子
1.16 细菌的人工培养程序及常用培养方法详解
1.17 干热灭菌法与湿热灭菌法的灭菌效果比较:原理、应用与选择指南
1.18 微生物营养物及其功能(一):碳源与氮源的作用及应用
1.19 微生物营养物及其功能(二):能源与无机盐的作用及应用
1.20 微生物营养物及其功能(三):生长因子与水分的作用及应用
1.21 微生物代谢的调节与控制:从“酶网络”理解发酵工业的核心逻辑
1.22 消毒与灭菌:微生物控制中的核心概念与应用
1.23 指示剂与指示液(一):实验室常用酸碱指示剂的配制与应用
1.24 指示剂与指示液(二):实验室常用酸碱与络合指示剂的配制、应用及注意事项
1.25 细菌的形态结构观察
1.26 菌种保藏:如何让微生物“长期休眠”而不失活?
1.27 微生物的分离、纯化及培养技术:从混合样品到纯培养菌株的关键步骤
1.28 微生物消毒灭菌法:实验室无菌控制的核心技术
1.29 微生物限度检查法常用试液详解:配制、保存与使用注意事项
1.30 微生物的五大共性:为什么这些看不见的生命能够遍布世界?
1.31 微生物学及其分科:从基础研究到实际应用的完整知识体系
1.32 逗点生物®逗邦培养基:基础实验,灵活之选
1.33 培养基及无菌水的制备:从称量、溶解到灭菌的关键控制点
1.34 空气与食品接触面微生物检验:生产环境卫生监控的关键方法与标准理解
1.35 培养基制备技术:从器皿清洗到质量控制的关键要点
1.36 酵母总RNA提取方法:热酚法的原理、流程与关键控制点
1.37 MS培养基配制中的关键注意事项:从母液分类到pH控制
1.38 SS培养基有效保存期内的质量控制:为什么“能保存多久”不能只看外观?
1.39 SS琼脂的质量控制及测试技术:如何判断一批选择性培养基是否真正合格?
1.40 EM微生物的组成、制备思路与应用注意事项
1.41 有效微生物技术及其特性:从复合菌群到农业环境应用的科学认识
1.42 微生物发酵饲料的前景与展望:从秸秆资源到蛋白替代的理性认识
1.43 培养基类产品分类界定:从旧版文件到现行监管思路的理解
1.44 TTC 添加的注意事项:显色、计数与抑菌影响如何平衡?
1.45 生化反应中 D 型与 L 型糖、醇、氨基酸的选择说明
1.46 华农 1 号培养基:用于猪痢疾短螺旋体分离的选择性血琼脂培养基
1.47 复合型培养基:用于窖泥与香泥培养的传统富集培养液
1.48 浅谈灭菌前后培养基 pH 值差异的原因
1.49 蛋白胨的定义及品类解析:培养基中重要的复合氮源
1.50 无菌检查方法适用性试验:为什么做、怎么做、如何判定?
1.51 无菌检查法中的浮游菌测试:洁净环境微生物监控的关键环节
1.52 粘球菌属中的变绿色粘球菌:形态、培养特征与生态来源
1.53 枯草杆菌黑色变种芽孢悬液的制备方法与质量控制要点
1.54 菌种的复苏与传代:消毒试验用微生物管理的基础环节
1.55 什么是 CFU?微生物检测中 CFU/g、CFU/mL 与“个/g”的区别
1.56 DNA-DNA 杂交同源性测定:从传统分类方法到基因组时代的应用
1.57 常见弧菌在不同选择性琼脂平板上的菌落特征
1.58 梭状芽孢杆菌菌株保存方法:短期、中长期与长期保存要点
1.59 食品中沙门氏菌检验的操作要点与常见问题解析
1.60 质控菌株的基本分类及特点:低浓度、高浓度与实验室应用
1.61 大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的从属关系
1.62 O/F 培养基的原理和使用方法:如何区分细菌氧化型与发酵型代谢?
1.63 无菌取样知识点汇总:从源头减少微生物检测误差
1.64 大肠菌群平板计数法常见问题解析:VRBA 使用、证实试验与结果计算
1.65 食品车间环境霉菌易产生部位、原因及预防措施
1.66 原料奶嗜冷菌的危害及其控制方法
1.67 无菌取样的关键点在哪里?规范抽样操作要点汇总
1.68 抽样检验的相关术语:从单位产品到抽样方案
1.69 微生物检测中斜面、液体和半固体培养基的接种操作要点
2 标准解读
2.1 2025版 GB 4789.30 单核细胞增生李斯特氏菌检验标准主要变化解读
2.2 《中国兽药典》中GA斜面管的质控:从无菌性、灵敏度到促生长能力的理解
2.3 GB/T 16294-2025 医药工业洁净室(区)沉降菌测试方法主要变化解读
2.4 GB/T 13092-2025《饲料中霉菌总数的测定》主要变化解读
2.5 《中国药典》无菌检查法培养基保存要求解析
2.6 《中国药典》微生物限度检查用培养基保存条件解析
2.7 2025版《中国药典》微生物培养基主要变化解读
2.8 2025版《中国药典》中菌悬液的制备与保存要点
2.9 GB 4789.40-2024克罗诺杆菌检验及鉴定方法解读
2.10 GB 4789.3-2025大肠菌群检验:平板计数法计算方法解读
2.11 《中国药典》中斜面琼脂培养基的质量控制要点
2.12 GB 4789.30-2025单核细胞增生李斯特氏菌检验标准主要变化解读
2.13 GB 4789.38-2025大肠埃希氏菌检验标准更新解读
2.14 GB 4789.3-2025大肠菌群检验标准更新解读
2.15 GB 4789.4-2024食品中沙门氏菌检验新版标准更改详解
2.16 GB 4789.28—2024《培养基和试剂的质量要求》新版标准主要变化解读
3 行业应用
3.1 无乳链球菌检验标准操作程序解读:淡水鱼及养殖环境样品中的分离与鉴定要点
3.2 婴幼儿配方奶粉中嗜热菌检验:原理、操作要点与结果计算
3.3 食品中肺炎克雷伯菌检验:增菌、分离、纯化与鉴定要点
3.4 动物胴体微生物采样计划与要求:采样方法、位点选择与操作要点
3.5 《化妆品安全技术规范(2022年版)》微生物检验方法修订要点解析
3.6 化妆品中霉菌和酵母菌计数检验方法解析
3.7 化妆品中金黄色葡萄球菌检验方法解析
3.8 化妆品中铜绿假单胞菌检验方法解析
3.9 化妆品中耐热大肠菌群检验方法解析
3.10 化妆品中菌落总数检验方法解析
3.11 化妆品微生物检验方法总则解析:采样、保存与供检样品制备
3.12 酿酒酵母菌检验标准操作程序解析:样品制备、平板计数与鉴定要点
3.13 产朊假丝酵母菌检验标准操作程序解析:平板计数、形态鉴定与结果报告
3.14 屎肠球菌检验标准操作程序解析:选择性平板计数、鉴定与结果报告
3.15 粪肠球菌检验标准操作程序解析:KF链球菌琼脂计数、鉴定与结果报告
3.16 地衣芽孢杆菌检验标准操作程序解析:热处理、平板计数与鉴定要点
3.17 枯草芽孢杆菌检验标准操作程序解析:热处理、平板计数与鉴定要点
3.18 嗜酸乳杆菌检验标准操作程序解析:MRS平板计数、厌氧培养与鉴定要点
3.19 植物乳杆菌检验标准操作程序解析:MRS平板计数、厌氧培养与鉴定要点
3.20 GB 4789.29—2020 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌检验方法解析
3.21 GB 4789.44—2020 创伤弧菌检验方法解析:水产品样品处理、PCR筛查与分离鉴定
3.22 霍乱弧菌检验标准操作程序解析:增菌分离、血清分型与毒力基因检测
3.23 弯曲菌检验标准操作程序解析:微需氧培养、滤膜分离与PCR鉴定
3.24 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌检验标准操作程序解析:增菌分离、产毒确认与米酵菌酸检测
3.25 梭状芽孢杆菌检验标准操作程序解析:厌氧增菌、分离鉴定与肉毒梭菌确认
3.26 创伤弧菌检验标准操作程序解析:定性检验、PCR鉴定与MPN计数
3.27 12类非饮用水水质检测标准汇总:污水、地下水、实验用水、锅炉水与工业用水如何区分?
3.28 出口食品中产气荚膜梭菌计数方法解析:SC平板、确证试验与结果换算
3.29 SN/T 3624—2013 出口食品中弓形菌检测方法解析:常规培养与PCR确认
4 培养基原理与介绍
4.1 胰蛋白胨大豆琼脂培养基(TSA):食品微生物检验中的参比培养基
4.2 沙氏葡萄糖琼脂培养基:食品微生物检验中真菌参比培养基的作用与质量控制
4.3 平板计数琼脂培养基(PCA):菌落总数测定的经典培养基
4.4 结晶紫中性红胆盐琼脂培养基(VRBA):大肠菌群测定中的选择性培养基
4.5 孟加拉红培养基:霉菌和酵母计数中的选择性培养基
4.6 营养琼脂培养基(Nutrient Agar):通用细菌培养、纯培养与消毒效果检测中的基础培养基
4.7 麦康凯琼脂培养基:志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌分离中的选择性鉴别培养基
4.8 煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLB):大肠菌群确证试验中的选择性发酵培养基
4.9 亮绿乳糖胆盐培养液:饮用天然矿泉水中大肠菌群检测的选择性发酵培养基
4.10 磷酸盐缓冲液(PBS):食品微生物检验中常用的样品稀释液
4.11 三糖铁琼脂(TSI):沙门氏菌等肠道革兰氏阴性杆菌鉴定中的经典生化培养基
4.12 脑心浸出液肉汤(BHI):营养要求较高微生物培养中的富营养培养基
4.13 亚硫酸铋琼脂(BS):沙门氏菌选择性分离中的经典培养基
4.14 脑心浸液琼脂:链球菌、肠球菌及营养苛求菌培养中的富营养培养基
4.15 志贺氏菌增菌肉汤:志贺氏菌选择性增菌中的关键培养基
4.16 改良山梨醇麦康凯(CT-SMAC)琼脂:O157 选择性分离培养基的原理与应用
4.17 胰蛋白胨大豆琼脂(TSA):通用营养培养基简介
4.18 大豆酪蛋白琼脂培养基(TSA):洁净室沉降菌与浮游菌监测常用培养基
4.19 麦康凯液体培养基:药品中大肠埃希氏菌选择性增菌培养基
4.20 木糖赖氨酸脱氧胆盐(XLD)琼脂:沙门氏菌和志贺氏菌分离培养的经典选择性培养基
4.21 哥伦比亚血琼脂基础:营养要求较高细菌培养与溶血试验常用培养基
4.22 Baird-Parker 琼脂基础:金黄色葡萄球菌选择性分离培养基的原理与应用
4.23 营养肉汤(NB):一般细菌增菌培养常用基础培养基
4.24 月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST):大肠菌群多管发酵法常用培养基
4.25 缓冲蛋白胨水(BPW):沙门氏菌和克罗诺杆菌检测中的前增菌培养基
4.26 D/E 中和琼脂:卫生环境表面微生物计数与分离培养的中和型培养基
4.27 GN 增菌液:革兰氏阴性肠杆菌选择性增菌培养基
4.28 EC 肉汤:粪大肠菌群与大肠埃希氏菌检测常用选择性培养基
4.29 7.5%氯化钠肉汤:金黄色葡萄球菌选择性增菌培养基
4.30 改良 EC 肉汤(mEC+n):大肠埃希氏菌 O157/NM 的选择性增菌培养基
4.31 亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液:沙门氏菌选择性增菌培养基
4.32 PALCAM 琼脂基础:单核细胞增生李斯特氏菌选择性分离培养基
4.33 月桂基硫酸盐胰蛋白胨-MUG(LST-MUG):大肠埃希氏菌与 O157/NM 鉴别试验培养基
4.34 胰酪胨大豆多黏菌素肉汤基础:蜡样芽孢杆菌增菌与 MPN 测定培养基
4.35 改良月桂基硫酸胰蛋白胨肉汤-万古霉素(mLST-Vm):克罗诺杆菌选择性增菌培养基
4.36 含 0.6% 酵母浸膏的胰酪胨大豆肉汤:李斯特氏菌培养常用营养增菌培养基
4.37 含 0.6% 酵母浸膏的胰酪胨大豆琼脂:李斯特氏菌纯培养常用基础培养基
4.38 假单胞菌 CFC 选择性培养基基础:铜绿假单胞菌选择性分离培养基
4.39 酸性肉汤:低酸性罐头食品商业无菌检验用培养基
4.40 RV 沙门菌增菌液体培养基:药品中沙门菌选择性增菌常用培养基
4.41 甘露醇氯化钠琼脂培养基:金黄色葡萄球菌选择性分离常用培养基
4.42 血琼脂基础:营养要求较高细菌培养与溶血试验常用培养基
4.43 甘露醇卵黄多黏菌素(MYP)琼脂基础:蜡样芽孢杆菌选择性分离培养基
4.44 乳糖胆盐发酵培养基:大肠菌群与粪大肠菌群测定常用培养基
4.45 伊红美蓝琼脂培养基(EMB):大肠菌群和革兰氏阴性肠道菌分离鉴别培养基
4.46 乳糖发酵培养基:大肠菌群乳糖发酵确证试验常用培养基
4.47 半固体琼脂:细菌动力观察、菌种保存与 H 抗原位相变异试验常用培养基

如何“拦住”不想长的菌——选择性培养基的秘密

2026-06-01 13:30:55
逗点生物
185
最后编辑:陈为 于 2026-06-18 17:00:04

如何“拦住”不想长的菌——选择性培养基的秘密

你有没有遇到过这样的场景:

一份粪便样本,里面混着几十种细菌。你想找的是志贺氏菌(痢疾的元凶),但平板上长出来的绝大多数是大肠杆菌——密密麻麻,粉红一片,把目标菌彻底淹没了。

你明知道志贺氏菌就在里面,但你就是找不到它。

怎么办?

答案不是“把它请出来”,而是把别人挡在门外。

这就是选择性培养基的核心思想——设门禁,只放行VIP。

一、为什么需要“拦人”?

普通培养基就像一个大食堂,谁都能进来吃饭。如果你的样本里目标菌多、杂菌少,那没问题。但现实恰恰相反:

粪便样本:大肠杆菌是绝对优势菌,志贺氏菌、沙门氏菌可能只占万分之一

痰液样本:正常菌群(草绿色链球菌、奈瑟菌等)铺天盖地,肺炎链球菌、流感嗜血杆菌躲在里面

环境样本:土壤、水体里的微生物种类成百上千,你要找的致病菌可能就那么几个

如果不加选择地让所有菌都长——目标菌会被“挤死”或者“淹没”,你根本看不见。

 

所以选择性培养基的任务是:在“食堂”门口设一道安检门,只放行你想找的那几位VIP,其他的一律拦下。

二、怎么“拦”?——常用的三类“门禁”

门禁1:加入抑菌剂——专杀“不速之客”

抑菌剂是选择性培养基最常用的“武器”。它们对某些种类的细菌有毒或抑制,但对目标菌是安全的。

常见抑菌剂及其“打击对象”:

抑菌剂

抑制对象

典型应用培养基

胆盐

革兰氏阳性菌(如葡萄球菌、链球菌)

MAC、SS、EMB

结晶紫

革兰氏阳性菌

MAC

伊红+美蓝

革兰氏阳性菌

EMB

亚碲酸钾

大多数杂菌,保留金黄色葡萄球菌

Baird-Parker

万古霉素

革兰氏阳性菌

选择性巧克力、CNA

多粘菌素B

大多数革兰氏阴性菌(除少数外)

哥伦比亚CNA

放线菌酮

真菌

沙保弱(选择性)

 

经典案例:EMB培养基(伊红-美蓝琼脂)

EMB里加了伊红和美蓝两种染料。这两种染料组合在一起,会抑制大多数革兰氏阳性菌(比如葡萄球菌、链球菌)的生长。

结果:

革兰氏阳性菌 → 长不出来或被严重抑制

革兰氏阴性菌(大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌等)→ 可以生长

更妙的是:大肠杆菌发酵乳糖产酸,会吸收伊红-美蓝染料,菌落变成紫黑色,还带着金属光泽——既是“放行”,又是“上色”,一箭双雕。

门禁的逻辑:你不是我要找的人,门口保安就把你拦下了。

门禁2:改变pH——用“酸”或“碱”过滤

有些微生物天生“耐酸”或“耐碱”,利用这一点可以轻松过滤掉对手。

最典型的例子:孟加拉红培养基(Rose Bengal Agar)

这种培养基的pH被调到了5.4-5.6(酸性)。在这个pH下:

大多数细菌:长不出来(细菌通常喜欢中性pH 6.5-7.5)

霉菌和酵母菌:长得很好(真菌普遍耐酸)

同时培养基里还加了氯霉素(抗生素,进一步抑制细菌),以及孟加拉红(染料,让霉菌菌落显粉红色,便于计数)。

结果:你想从发霉的食品或土壤里分离真菌,用普通培养基会细菌疯长;用孟加拉红,只有霉菌和酵母能长。

pH门禁的逻辑:改变餐厅的“口味”,不习惯这个味道的客人自己就走了。

门禁3:调整营养成分——不给杂菌必需营养,让其无法生长

还有一种更“温柔”的办法:不给某些菌提供它们必需的营养。

例如,一些营养缺陷型的细菌需要特定的维生素或氨基酸。如果在培养基里“断供”,它们就长不起来。而目标菌因为能自己合成这些物质,照样能生长。

这种方式在实际应用中相对少见,通常与其他选择性手段配合使用。

三、一张表看懂常见选择性培养基

培养基名称

目标菌

门禁方式

典型特征

麦康凯(MAC)

革兰氏阴性肠杆菌

胆盐+结晶紫(抑阳性菌)

乳糖发酵→粉红

SS琼脂

沙门氏菌、志贺氏菌

胆盐+柠檬酸钠+煌绿

沙门氏菌→黑色菌落

EMB琼脂

革兰氏阴性肠杆菌

伊红+美蓝

大肠杆菌→金属光泽

Baird-Parker

金黄色葡萄球菌

亚碲酸钾+氯化锂

金葡→黑色带透明环

TCBS琼脂

弧菌(霍乱弧菌等)

胆盐+高pH(8.6)

黄色/绿色菌落

孟加拉红

霉菌、酵母菌

pH 5.4-5.6+氯霉素

霉菌→粉红色

 

四、选择性不是“100%拦死”,而是“让目标菌脱颖而出”

需要说明一点:没有一种选择性培养基能把所有杂菌100%拦死。有些“脸皮厚”的杂菌还是会顽强地长出来。

但这没关系。

选择性培养基的目的不是绝对纯化,而是大幅减少杂菌的数量和生长速度,让目标菌有机会长成可识别的单菌落。

打个比方:

杂菌从1亿个 → 减到1000个

目标菌从100个 → 长到10000个

这样就够了。你就能在平板上挑到目标菌。

五、逗点生物:为您设计最合适的“门禁系统”

不同的样本、不同的目标菌,需要不同的“门禁组合”。一个有效的选择性培养基,往往是抑菌剂种类、浓度、pH值、营养成分四者的精密平衡——抑菌剂加少了,拦不住杂菌;加多了,连目标菌也长不出来。

逗点生物提供全系列选择性培养基,覆盖临床、食品、环境、制药等多个领域:

肠道菌检测系列:MAC、SS、XLD、HE、EMB

致病菌检测系列:Baird-Parker(金葡)、PALCAM(李斯特)、TCBS(弧菌)

真菌检测系列:孟加拉红、沙保弱(含氯霉素)、念珠菌显色

特殊需求定制:您指定目标菌和样本类型,我们来调配最合适的抑菌剂组合

更重要的是:我们可以根据您的实际样本背景(杂菌种类、丰度),优化抑菌剂的种类和浓度,在“拦住杂菌”和“保护目标菌”之间找到最佳平衡点。

因为门禁太松,坏人进来了;门禁太严,好人也进不来——我们要的是“刚刚好”。