脑心浸出液肉汤（BHI）：营养要求较高微生物培养中的富营养培养基

产品信息

培养基配方

注：原资料中“十二水碳酸氢二钠”表述不严谨，且与检验原理中的“缓冲剂”说明不一致。结合BHI常见配方，应修正为磷酸氢二钠类缓冲盐；实际生产和标签标识中如涉及水合形式，应以产品配方文件为准。

检验原理

BHI的核心特点是 营养丰富、选择性压力低、适合复苏和纯培养。胰蛋白胨提供微生物生长所需的氨基酸、小肽和氮源；牛心浸粉含有动物组织来源的营养物质，可为营养要求较高的菌株提供维生素、矿物质和生长因子；葡萄糖作为易利用能源，有助于细胞快速恢复代谢；氯化钠维持渗透压；磷酸盐缓冲体系则帮助培养基保持较稳定的pH环境。

由于BHI不含胆盐、染料、抗生素等选择性抑制成分，它能支持较多微生物生长，但也意味着它不适合直接用于复杂样品中目标菌的选择性分离。对于食品微生物检验中的金黄色葡萄球菌，BHI更多用于可疑菌落纯培养、复苏或后续确认试验前的增殖培养，而不是替代选择性平板或确证方法。

使用方法

称取本品 37.0 g，加入 1 L 蒸馏水或去离子水中，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装后于 121℃高压灭菌15 min。

制备时应确保粉末完全溶解，避免出现未溶颗粒或局部焦化。灭菌后培养液应澄清至轻微透明或呈均一状态，不应出现异常沉淀、絮状物、污染或明显变色。分装量应根据实验用途确定，用于纯培养时应保证试管或培养瓶有足够空间，避免培养过程中溢出或气体交换不足。

质量控制

下列质控菌株接种后，于 36℃±1℃需氧培养18 h～24 h，观察结果应符合要求。

金黄色葡萄球菌 ATCC 6538 在BHI中应表现为明显生长，培养液浑浊度达到要求，说明培养基具有良好的促生长能力。若质控菌株生长不良，应检查培养基称量、溶解、灭菌、pH、保存状态、接种量和菌株活力。

应用场景

BHI常用于营养要求较高微生物的培养，也适用于金黄色葡萄球菌等食品微生物检验中的纯培养环节。由于其营养丰富，可帮助从选择性平板上挑取的可疑菌落恢复生长，为后续凝固酶试验、生化鉴定或其他确认试验提供充足的新鲜培养物。

在实际应用中，BHI也可用于部分链球菌、肺炎球菌、李斯特菌、酵母菌等微生物的培养，但不同标准方法对培养基、培养温度、培养时间和确认步骤要求不同，不能简单以“能生长”代替标准规定流程。

使用注意事项

BHI是富营养液体培养基，一旦受到污染，杂菌容易快速生长。因此制备、分装、接种和保存过程应严格执行无菌操作。已灭菌培养基使用前应观察澄清度和颜色，如出现浑浊、沉淀、絮状物或疑似污染，应停止使用。

由于BHI营养丰富，不适合作为选择性筛查培养基。如果样品中背景菌较多，应先按标准方法进行选择性分离或增菌，再将可疑菌落转接至BHI进行纯培养或后续试验。用于金黄色葡萄球菌检验时，应结合相应标准中的选择性平板、菌落形态、血浆凝固酶试验或其他确认方法综合判定。

干粉培养基应密封、避光、干燥保存，防止吸潮、结块和变色。开瓶后应及时旋紧瓶盖，取用时使用洁净干燥工具，避免水分或污染物进入瓶内。

常见问题与控制建议

若培养后目标菌浑浊度不足，可能与菌株活力下降、接种量过低、培养时间不足、灭菌过度、pH异常或培养基保存不当有关。若未接种对照出现浑浊，则应首先考虑污染，需排查灭菌效果、分装容器、操作环境和接种过程。

若培养基灭菌后颜色明显加深或出现异常沉淀，应检查加热时间是否过长、灭菌负载是否过大、配制水质量是否合格以及粉末是否吸潮。BHI含有丰富有机营养成分，过度加热可能影响促生长能力，因此应按规定条件灭菌，不宜随意延长灭菌时间。

总结

脑心浸出液肉汤（BHI）是一种营养丰富的非选择性液体培养基，适用于细菌、酵母、霉菌以及部分营养要求较高微生物的培养。其通过胰蛋白胨和牛心浸粉提供丰富营养，以葡萄糖提供能量，以氯化钠维持渗透压，并通过磷酸盐缓冲体系稳定pH。

本产品按 37.0 g/L 配制，采用 121℃高压灭菌15 min。质量控制中，金黄色葡萄球菌 ATCC 6538 应在36℃±1℃培养18 h～24 h后表现为明显浑浊。只有在配制、灭菌、无菌性、pH和促生长能力均受控的情况下，BHI才能为金黄色葡萄球菌纯培养及营养要求较高微生物培养提供可靠支持。