碱性蛋白胨水：用于霍乱弧菌增菌培养的经典基础培养基

一、产品用途与基本信息

二、配方组成、用量及作用

三、培养基原理

碱性蛋白胨水的核心是“碱性环境 + 盐环境 + 基础营养”。蛋白胨为细菌提供可利用的氮源、氨基酸和短肽，使目标菌在液体环境中恢复并增殖。氯化钠提供适宜盐度和渗透压环境，有利于弧菌类细菌生长。较高的pH是该培养基的重要选择性因素，霍乱弧菌对碱性环境具有较强适应性，而许多肠道伴随菌在pH 8.5左右的条件下生长会受到一定限制。

需要注意的是，碱性蛋白胨水并不是强选择性培养基。它可以促进霍乱弧菌生长，也能支持副溶血性弧菌等其他弧菌生长，部分耐受碱性和盐分的非目标菌也可能增殖。因此，APW增菌后的阳性判断不能仅看肉汤浑浊，必须通过后续选择性平板和确认试验完成。

四、使用方法

称取本品20.0 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，按实验需要分装后，于121 ℃高压灭菌15 min，冷却备用。

灭菌后的培养基应澄清或近澄清，无污染、无明显异常沉淀和异味。使用前应检查pH，确保维持在8.5±0.2。若pH偏低，培养基对杂菌的抑制作用可能下降；若pH过高，则可能影响部分目标菌恢复。接种样品后通常于36 ℃培养，培养结束后应及时转种至选择性分离平板，避免过度培养导致背景菌增多。

五、质量控制

六、结果观察与判读

七、为什么碱性蛋白胨水适合弧菌增菌

弧菌类细菌多与水环境、海产品和含盐环境有关，对盐分和偏碱性条件具有一定适应能力。碱性蛋白胨水利用这一生态特征，为弧菌创造相对有利的富集环境。蛋白胨提供营养，氯化钠提供盐分，pH 8.5左右的碱性环境则降低部分非目标肠道菌竞争能力。

不过，APW的选择性主要是“环境选择”，而不是依靠抗生素或强抑菌剂。因此它更适合用于弧菌富集，而不是用于直接确认或计数。若样品背景菌复杂，增菌后必须尽快分离，避免非目标菌在后期恢复生长。

八、与TCBS琼脂的关系

碱性蛋白胨水和TCBS琼脂在霍乱弧菌检测流程中作用不同。APW用于液体增菌，提高目标菌数量；TCBS琼脂用于选择性分离和初步观察菌落形态。

因此，APW不能替代TCBS进行菌落分离，也不能替代血清学或分子确认。二者配合使用，才能提高检测的灵敏度和准确性。

九、常见问题与原因分析

若霍乱弧菌质控菌株生长不良，应检查培养基配制浓度、pH是否为8.5±0.2、氯化钠是否正确加入、灭菌条件是否合适、菌株活性、接种量和培养温度。pH偏离是影响APW性能的重要原因，尤其是pH偏低时，选择性下降；pH偏高时，可能抑制受损目标菌恢复。

若大肠埃希氏菌未见抑制或背景菌大量生长，应重点检查pH是否偏低、培养时间是否过长、样品背景菌量是否过高，以及是否及时转种选择性平板。APW本身不含抗菌剂，不能完全依赖其抑制杂菌。

若培养基灭菌后出现浑浊或沉淀，应与空白对照和质控结果结合判断。正常APW配方简单，一般不应有明显沉淀。若未接种培养基培养后浑浊，说明存在污染或灭菌不彻底，应重新配制。

十、安全与应用边界

霍乱弧菌属于重要肠道致病菌，部分O1和O139群可引起霍乱。食品、环境或水产品中检出疑似霍乱弧菌时，应严格按照标准方法和实验室生物安全要求进行确认与报告。APW只是检测流程中的增菌工具，不能用于疾病诊断，也不应用于临床检验。

用于食品或进出口样品检测时，应根据SN/T 1022-2010等方法要求选择样品量、增菌条件、分离平板和确认项目。对于非食品样品或环境样品，应以对应检测规范为准。

十一、贮存、废物处理与注意事项

本品不得用于临床检验。干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，避免吸潮、结块和pH性能下降。称量时应注意粉尘防护，建议佩戴口罩并在通风良好的环境中操作。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后受储存湿度、温度和使用频次影响，保质时间可能缩短。

配制后的碱性蛋白胨水应按实验室验证条件保存，并在规定期限内使用。若出现污染、pH异常、明显沉淀、异味或质控结果不符合要求，应停止使用并排查原因。检测后的带菌培养液、平板、试管和接触样品的耗材，应置于121 ℃高压灭菌30 min后，再按实验室生物安全要求处理。

参考标准与资料

SN/T 1022-2010《进出口食品中霍乱弧菌检验方法》。

碱性蛋白胨水（Alkaline Peptone Water）及弧菌选择性增菌相关资料。

霍乱弧菌、副溶血性弧菌及弧菌类食品微生物检测相关资料。