微生物知识手册介绍
1 基础知识
1.1 揭开微生物的“食堂”——培养基到底是什么?
1.2 一份培养基里都有哪些“食材”?——四大核心成分
1.3 硬邦邦 vs 稀溜溜——固体、液体、半固体培养基的区别
1.4 一眼认出细菌“颜色”——鉴别培养基与显色培养基原理
1.5 如何“拦住”不想长的菌——选择性培养基的秘密
1.6 历史上第一碗“细菌汤”——巴斯德与肉汤培养基
1.7 科赫的大发明——如何让细菌“定住”便于观察
1.8 培养基的pH值——差0.1可能就养不出来
1.9 干粉 vs 即用型——该买哪一种?
1.10 长了菌的平板千万别直接扔——培养基废弃物安全处理
1.11 中国医学微生物菌种保藏管理办法
1.12 金黄色葡萄球菌的检测方法
1.13 微生物培养基基础知识:培养基分类与常用术语详解
1.14 实验室技术——生物安全柜的正确使用方法与注意事项
1.15 细菌基因突变的类型和机制:从碱基变化到转位因子
1.16 细菌的人工培养程序及常用培养方法详解
1.17 干热灭菌法与湿热灭菌法的灭菌效果比较:原理、应用与选择指南
1.18 微生物营养物及其功能(一):碳源与氮源的作用及应用
1.19 微生物营养物及其功能(二):能源与无机盐的作用及应用
1.20 微生物营养物及其功能(三):生长因子与水分的作用及应用
1.21 微生物代谢的调节与控制:从“酶网络”理解发酵工业的核心逻辑
1.22 消毒与灭菌:微生物控制中的核心概念与应用
1.23 指示剂与指示液(一):实验室常用酸碱指示剂的配制与应用
1.24 指示剂与指示液(二):实验室常用酸碱与络合指示剂的配制、应用及注意事项
1.25 细菌的形态结构观察
1.26 菌种保藏:如何让微生物“长期休眠”而不失活?
1.27 微生物的分离、纯化及培养技术:从混合样品到纯培养菌株的关键步骤
1.28 微生物消毒灭菌法:实验室无菌控制的核心技术
1.29 微生物限度检查法常用试液详解:配制、保存与使用注意事项
1.30 微生物的五大共性:为什么这些看不见的生命能够遍布世界?
1.31 微生物学及其分科:从基础研究到实际应用的完整知识体系
1.32 逗点生物®逗邦培养基:基础实验,灵活之选
1.33 培养基及无菌水的制备:从称量、溶解到灭菌的关键控制点
1.34 空气与食品接触面微生物检验:生产环境卫生监控的关键方法与标准理解
1.35 培养基制备技术:从器皿清洗到质量控制的关键要点
1.36 酵母总RNA提取方法:热酚法的原理、流程与关键控制点
1.37 MS培养基配制中的关键注意事项:从母液分类到pH控制
1.38 SS培养基有效保存期内的质量控制:为什么“能保存多久”不能只看外观?
1.39 SS琼脂的质量控制及测试技术:如何判断一批选择性培养基是否真正合格?
1.40 EM微生物的组成、制备思路与应用注意事项
1.41 有效微生物技术及其特性:从复合菌群到农业环境应用的科学认识
1.42 微生物发酵饲料的前景与展望:从秸秆资源到蛋白替代的理性认识
1.43 培养基类产品分类界定:从旧版文件到现行监管思路的理解
1.44 TTC 添加的注意事项:显色、计数与抑菌影响如何平衡?
1.45 生化反应中 D 型与 L 型糖、醇、氨基酸的选择说明
1.46 华农 1 号培养基:用于猪痢疾短螺旋体分离的选择性血琼脂培养基
1.47 复合型培养基:用于窖泥与香泥培养的传统富集培养液
1.48 浅谈灭菌前后培养基 pH 值差异的原因
1.49 蛋白胨的定义及品类解析:培养基中重要的复合氮源
1.50 无菌检查方法适用性试验:为什么做、怎么做、如何判定?
1.51 无菌检查法中的浮游菌测试:洁净环境微生物监控的关键环节
1.52 粘球菌属中的变绿色粘球菌:形态、培养特征与生态来源
1.53 枯草杆菌黑色变种芽孢悬液的制备方法与质量控制要点
1.54 菌种的复苏与传代:消毒试验用微生物管理的基础环节
1.55 什么是 CFU?微生物检测中 CFU/g、CFU/mL 与“个/g”的区别
1.56 DNA-DNA 杂交同源性测定:从传统分类方法到基因组时代的应用
1.57 常见弧菌在不同选择性琼脂平板上的菌落特征
1.58 梭状芽孢杆菌菌株保存方法:短期、中长期与长期保存要点
1.59 食品中沙门氏菌检验的操作要点与常见问题解析
1.60 质控菌株的基本分类及特点:低浓度、高浓度与实验室应用
1.61 大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的从属关系
1.62 O/F 培养基的原理和使用方法:如何区分细菌氧化型与发酵型代谢?
1.63 无菌取样知识点汇总:从源头减少微生物检测误差
1.64 大肠菌群平板计数法常见问题解析:VRBA 使用、证实试验与结果计算
1.65 食品车间环境霉菌易产生部位、原因及预防措施
1.66 原料奶嗜冷菌的危害及其控制方法
1.67 无菌取样的关键点在哪里?规范抽样操作要点汇总
1.68 抽样检验的相关术语:从单位产品到抽样方案
1.69 微生物检测中斜面、液体和半固体培养基的接种操作要点
2 标准解读
2.1 2025版 GB 4789.30 单核细胞增生李斯特氏菌检验标准主要变化解读
2.2 《中国兽药典》中GA斜面管的质控:从无菌性、灵敏度到促生长能力的理解
2.3 GB/T 16294-2025 医药工业洁净室(区)沉降菌测试方法主要变化解读
2.4 GB/T 13092-2025《饲料中霉菌总数的测定》主要变化解读
2.5 《中国药典》无菌检查法培养基保存要求解析
2.6 《中国药典》微生物限度检查用培养基保存条件解析
2.7 2025版《中国药典》微生物培养基主要变化解读
2.8 2025版《中国药典》中菌悬液的制备与保存要点
2.9 GB 4789.40-2024克罗诺杆菌检验及鉴定方法解读
2.10 GB 4789.3-2025大肠菌群检验:平板计数法计算方法解读
2.11 《中国药典》中斜面琼脂培养基的质量控制要点
2.12 GB 4789.30-2025单核细胞增生李斯特氏菌检验标准主要变化解读
2.13 GB 4789.38-2025大肠埃希氏菌检验标准更新解读
2.14 GB 4789.3-2025大肠菌群检验标准更新解读
2.15 GB 4789.4-2024食品中沙门氏菌检验新版标准更改详解
2.16 GB 4789.28—2024《培养基和试剂的质量要求》新版标准主要变化解读
3 行业应用
3.1 无乳链球菌检验标准操作程序解读:淡水鱼及养殖环境样品中的分离与鉴定要点
3.2 婴幼儿配方奶粉中嗜热菌检验:原理、操作要点与结果计算
3.3 食品中肺炎克雷伯菌检验:增菌、分离、纯化与鉴定要点
3.4 动物胴体微生物采样计划与要求:采样方法、位点选择与操作要点
3.5 《化妆品安全技术规范(2022年版)》微生物检验方法修订要点解析
3.6 化妆品中霉菌和酵母菌计数检验方法解析
3.7 化妆品中金黄色葡萄球菌检验方法解析
3.8 化妆品中铜绿假单胞菌检验方法解析
3.9 化妆品中耐热大肠菌群检验方法解析
3.10 化妆品中菌落总数检验方法解析
3.11 化妆品微生物检验方法总则解析:采样、保存与供检样品制备
3.12 酿酒酵母菌检验标准操作程序解析:样品制备、平板计数与鉴定要点
3.13 产朊假丝酵母菌检验标准操作程序解析:平板计数、形态鉴定与结果报告
3.14 屎肠球菌检验标准操作程序解析:选择性平板计数、鉴定与结果报告
3.15 粪肠球菌检验标准操作程序解析:KF链球菌琼脂计数、鉴定与结果报告
3.16 地衣芽孢杆菌检验标准操作程序解析:热处理、平板计数与鉴定要点
3.17 枯草芽孢杆菌检验标准操作程序解析:热处理、平板计数与鉴定要点
3.18 嗜酸乳杆菌检验标准操作程序解析:MRS平板计数、厌氧培养与鉴定要点
3.19 植物乳杆菌检验标准操作程序解析:MRS平板计数、厌氧培养与鉴定要点
3.20 GB 4789.29—2020 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌检验方法解析
3.21 GB 4789.44—2020 创伤弧菌检验方法解析:水产品样品处理、PCR筛查与分离鉴定
3.22 霍乱弧菌检验标准操作程序解析:增菌分离、血清分型与毒力基因检测
3.23 弯曲菌检验标准操作程序解析:微需氧培养、滤膜分离与PCR鉴定
3.24 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌检验标准操作程序解析:增菌分离、产毒确认与米酵菌酸检测
3.25 梭状芽孢杆菌检验标准操作程序解析:厌氧增菌、分离鉴定与肉毒梭菌确认
3.26 创伤弧菌检验标准操作程序解析:定性检验、PCR鉴定与MPN计数
3.27 12类非饮用水水质检测标准汇总:污水、地下水、实验用水、锅炉水与工业用水如何区分?
3.28 出口食品中产气荚膜梭菌计数方法解析:SC平板、确证试验与结果换算
3.29 SN/T 3624—2013 出口食品中弓形菌检测方法解析:常规培养与PCR确认
4 培养基原理与介绍
4.1 胰蛋白胨大豆琼脂培养基(TSA):食品微生物检验中的参比培养基
4.2 沙氏葡萄糖琼脂培养基:食品微生物检验中真菌参比培养基的作用与质量控制
4.3 平板计数琼脂培养基(PCA):菌落总数测定的经典培养基
4.4 结晶紫中性红胆盐琼脂培养基(VRBA):大肠菌群测定中的选择性培养基
4.5 孟加拉红培养基:霉菌和酵母计数中的选择性培养基
4.6 营养琼脂培养基(Nutrient Agar):通用细菌培养、纯培养与消毒效果检测中的基础培养基
4.7 麦康凯琼脂培养基:志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌分离中的选择性鉴别培养基
4.8 煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLB):大肠菌群确证试验中的选择性发酵培养基
4.9 亮绿乳糖胆盐培养液:饮用天然矿泉水中大肠菌群检测的选择性发酵培养基
4.10 磷酸盐缓冲液(PBS):食品微生物检验中常用的样品稀释液
4.11 三糖铁琼脂(TSI):沙门氏菌等肠道革兰氏阴性杆菌鉴定中的经典生化培养基
4.12 脑心浸出液肉汤(BHI):营养要求较高微生物培养中的富营养培养基
4.13 亚硫酸铋琼脂(BS):沙门氏菌选择性分离中的经典培养基
4.14 脑心浸液琼脂:链球菌、肠球菌及营养苛求菌培养中的富营养培养基
4.15 志贺氏菌增菌肉汤:志贺氏菌选择性增菌中的关键培养基
4.16 改良山梨醇麦康凯(CT-SMAC)琼脂:O157 选择性分离培养基的原理与应用
4.17 胰蛋白胨大豆琼脂(TSA):通用营养培养基简介
4.18 大豆酪蛋白琼脂培养基(TSA):洁净室沉降菌与浮游菌监测常用培养基
4.19 麦康凯液体培养基:药品中大肠埃希氏菌选择性增菌培养基
4.20 木糖赖氨酸脱氧胆盐(XLD)琼脂:沙门氏菌和志贺氏菌分离培养的经典选择性培养基
4.21 哥伦比亚血琼脂基础:营养要求较高细菌培养与溶血试验常用培养基
4.22 Baird-Parker 琼脂基础:金黄色葡萄球菌选择性分离培养基的原理与应用
4.23 营养肉汤(NB):一般细菌增菌培养常用基础培养基
4.24 月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST):大肠菌群多管发酵法常用培养基
4.25 缓冲蛋白胨水(BPW):沙门氏菌和克罗诺杆菌检测中的前增菌培养基
4.26 D/E 中和琼脂:卫生环境表面微生物计数与分离培养的中和型培养基
4.27 GN 增菌液:革兰氏阴性肠杆菌选择性增菌培养基
4.28 EC 肉汤:粪大肠菌群与大肠埃希氏菌检测常用选择性培养基
4.29 7.5%氯化钠肉汤:金黄色葡萄球菌选择性增菌培养基
4.30 改良 EC 肉汤(mEC+n):大肠埃希氏菌 O157/NM 的选择性增菌培养基
4.31 亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液:沙门氏菌选择性增菌培养基
4.32 PALCAM 琼脂基础:单核细胞增生李斯特氏菌选择性分离培养基
4.33 月桂基硫酸盐胰蛋白胨-MUG(LST-MUG):大肠埃希氏菌与 O157/NM 鉴别试验培养基
4.34 胰酪胨大豆多黏菌素肉汤基础:蜡样芽孢杆菌增菌与 MPN 测定培养基
4.35 改良月桂基硫酸胰蛋白胨肉汤-万古霉素(mLST-Vm):克罗诺杆菌选择性增菌培养基
4.36 含 0.6% 酵母浸膏的胰酪胨大豆肉汤:李斯特氏菌培养常用营养增菌培养基
4.37 含 0.6% 酵母浸膏的胰酪胨大豆琼脂:李斯特氏菌纯培养常用基础培养基
4.38 假单胞菌 CFC 选择性培养基基础:铜绿假单胞菌选择性分离培养基
4.39 酸性肉汤:低酸性罐头食品商业无菌检验用培养基
4.40 RV 沙门菌增菌液体培养基:药品中沙门菌选择性增菌常用培养基
4.41 甘露醇氯化钠琼脂培养基:金黄色葡萄球菌选择性分离常用培养基
4.42 血琼脂基础:营养要求较高细菌培养与溶血试验常用培养基
4.43 甘露醇卵黄多黏菌素(MYP)琼脂基础:蜡样芽孢杆菌选择性分离培养基
4.44 乳糖胆盐发酵培养基:大肠菌群与粪大肠菌群测定常用培养基
4.45 伊红美蓝琼脂培养基(EMB):大肠菌群和革兰氏阴性肠道菌分离鉴别培养基
4.46 乳糖发酵培养基:大肠菌群乳糖发酵确证试验常用培养基
4.47 半固体琼脂:细菌动力观察、菌种保存与 H 抗原位相变异试验常用培养基

科赫的大发明——如何让细菌“定住”便于观察

2026-06-01 13:30:55
逗点生物
181
最后编辑:陈为 于 2026-06-18 17:00:04

科赫的大发明——如何让细菌“定住”便于观察

巴斯德用一碗肉汤,证明微生物需要食物才能生长。但他面临一个棘手的问题:

肉汤是液体。 细菌在里面自由游动、疯狂繁殖,整瓶汤变得浑浊——但你根本分不清这里面是一种细菌还是好几种混在一起。

你想观察“单个细菌”长什么样?在浑浊的肉汤里,那是痴人说梦。

怎么办?你得想办法让细菌定住。

这个难题,最终被罗伯特·科赫和他的团队解决了。而解决它的关键材料,来自一个你可能完全想不到的地方——一位家庭主妇的厨房。

一、从明胶开始:一次不太成功的尝试

罗伯特·科赫(Robert Koch),德国医生、细菌学奠基人之一。他和巴斯德并称为微生物学的两大奠基人。

科赫最想做的事情是:把不同种类的细菌分开。只有分开,你才能研究每一种细菌的特点——它长什么样?它导致什么病?它怕什么药?

他尝试过用明胶作为凝固剂,把液体培养基变成固体。

明胶是从动物皮和骨头里提取的蛋白质,加热溶解,冷却凝固。用明胶做平板,细菌就能“定”在上面长成一个一个的菌落——这个思路是对的。

但明胶有几个致命缺点:

熔点太低:明胶在35℃左右就融化了。而很多致病菌的最佳培养温度是37℃(人的体温)。你刚把平板放进温箱,明胶就化成了汤。

有些细菌能吃明胶:一些细菌(比如变形杆菌、枯草芽杆菌)能分泌蛋白酶,把明胶“吃掉”。培养几天后,平板变得坑坑洼洼,菌落也糊了。

科赫很头疼。他需要一种更好的“凝固剂”——耐热、不能被微生物分解、透明、无毒。

答案,藏在他同事的厨房里。

二、Fanny Hesse的“果酱”:琼脂改变了历史

沃尔特·赫塞(Walter Hesse)是科赫实验室的一名助手。他的妻子Fanny Hesse,平时负责为实验室准备培养基。

Fanny不是科学家出身,但她在厨房里积累了丰富的经验。她注意到一种来自东方的食材——琼脂(agar),也叫“石花菜提取物”。

琼脂是什么?是从红藻(石花菜、江蓠等)中提取的一种多糖。在亚洲,人们用它做果冻、甜点、汤羹的凝固剂——类似于今天的吉利丁,但它来自海藻而不是动物。

Fanny向丈夫建议:为什么不试试琼脂? 她在厨房里用过,知道它的特性非常特别。

结果一试,科赫喜出望外。琼脂完美地解决了明胶的所有问题:

特性

明胶

琼脂

来源

动物皮骨

红藻(植物)

微生物能否分解

能(很多细菌有蛋白酶)

不能(几乎没有细菌能分解)

熔点

~35℃(温箱里会化)

~95℃(沸水中才溶化)

凝固点

~25℃

32-40℃(冷却到不烫手就凝固)

透明度

较好

极佳,比明胶更透明

电性

带正电荷

带负电荷,不干扰染色反应

简单说:琼脂耐高温、微生物不吃它、透明好看、凝固温度合适——它就是固体培养基梦寐以求的那个材料。

科赫立刻采用琼脂替代明胶。从此,固体培养基正式诞生。

那一年是1881年。这个改变,直接催生了现代微生物学。

三、固体培养基的革命:单菌落与纯培养

有了琼脂,科赫可以做出平整、透明、耐温的固体平板。

他做了一个今天任何微生物专业学生都会做的操作:划线分离。

把混有多种细菌的样本,用接种环在琼脂平板表面划线。每划一次,细菌的数量就被稀释一次。最后,平板上会出现孤立的单菌落——每个菌落来自最初的一个细菌。

一个细菌 → 在固体表面被“定住” → 分裂成成千上万个后代 → 形成一个肉眼可见的菌落 → 挑取这个菌落 → 得到纯种 → 可以研究它的全部特性

这就是细菌纯培养技术。

没有琼脂,就没有单菌落。没有单菌落,就没有纯培养。没有纯培养,就没有对致病菌的精准鉴定——结核杆菌、霍乱弧菌、炭疽杆菌……科赫后来发现的这些病原菌,全都依赖于琼脂固体培养基。

科赫法则:证明一种细菌是某种疾病的病因,必须满足四个条件——其中第一条就是“必须在每一例患者体内都能分离到这种细菌的纯培养”。没有琼脂,这条根本做不到。

四、被遗忘的名字:Fanny Hesse

这是一个令人唏嘘的事实:

在很长一段时间里,琼脂的引入被归功于科赫或沃尔特·赫塞。Fanny Hesse的名字,几乎没有出现在任何教科书里。

她不是博士,不是教授,没有发表过论文。她只是一个实验室助手(不带薪)的妻子,在厨房里煮培养基、洗瓶子、做杂务。但她那看似“微不足道”的建议——“你们试试琼脂吧”——改变了整个微生物学的历史。

直到20世纪后期,科学史学家才开始挖掘和承认她的贡献。今天,越来越多的教材和文献在提到“琼脂用于微生物培养”时,会加上她的名字。

Fanny Hesse,一位被忽视的女性科学贡献者。没有她的厨房经验,科赫可能还在用那该死的明胶。

五、琼脂的今天:依然是微生物实验室的“标配”

150年过去了,琼脂仍然是微生物实验室最常用的凝固剂。没有任何人工合成材料能完全替代它——因为它的特性组合太独特了。

你今天在实验室里:

倒平板

做斜面

做半固体穿刺

——每一件事,都离不开琼脂。而每一克琼脂,都在延续Fanny Hesse 1881年那个来自厨房的灵光一闪。

逗点生物:致敬传统,更要超越传统

我们深知,琼脂是微生物培养基的“骨架”。琼脂的质量——凝胶强度、透明度、杂质含量、批间一致性——直接影响您每一次实验的结果。

逗点生物严格筛选琼脂原料供应商,每一批琼脂都经过凝胶强度测试、透明度检测、微生物生长试验三重质控:

凝胶强度达标:平板不裂不碎,倒置培养不掉落

透明度优秀:菌落形态、颜色变化清晰可见

无抑制物质:不影响任何目标菌的正常生长

批间差极小:今天做的平板,和上周、上个月做的,完全一样

同时,我们提供多种琼脂浓度的即用型产品:

固体平板(1.5%琼脂)→ 单菌落分离

半固体(0.3%-0.5%琼脂)→ 运动性检测

斜面(1.5%琼脂)→ 菌种保存

Fanny Hesse的厨房,到您实验室的洁净台——琼脂的故事还在继续。逗点生物让这个故事,更加稳定、可靠、值得信赖。