麦康凯琼脂培养基：志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌分离中的选择性鉴别培养基

产品信息

培养基配方

检验原理

麦康凯琼脂的核心原理是 选择性抑制+乳糖发酵鉴别。

培养基中的胆盐和结晶紫共同抑制多数革兰氏阳性菌，使肠道来源的革兰氏阴性杆菌更容易被分离。蛋白胨为细菌提供基础营养，氯化钠维持渗透压，琼脂形成稳定固体表面。

乳糖和中性红构成鉴别系统。能够发酵乳糖的细菌，如多数大肠埃希氏菌，可产酸使菌落及周围环境pH下降，中性红在酸性条件下呈红色，因此形成粉红色至红色菌落，部分菌落周围可出现胆酸盐沉淀。不能发酵乳糖或乳糖发酵能力弱的细菌，如多数志贺氏菌，通常形成无色至浅色、半透明菌落。

使用方法

称取本品 51.5 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，搅拌加热至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15 min。

制备时应充分溶解琼脂和各成分，避免局部焦化、沉淀或颜色不均。灭菌后冷却至适宜温度倾注平板，平板应表面平整、颜色均一、无污染、无明显气泡和异常沉淀。制备后的平板应按实验室SOP避光、密封保存，并在经验证的有效期内使用。

质量控制

下列质控菌株接种后，于 36℃±1℃需氧培养24 h，结果应符合下表要求。

PR表示培养基对目标菌株的生产率或生长率，用于评价促生长能力。G值用于评价选择性，金黄色葡萄球菌作为革兰氏阳性菌应受到明显抑制。若大肠埃希氏菌或福氏志贺氏菌生长率不足，需排查培养基配制、灭菌、pH、保存条件和菌株活力；若金黄色葡萄球菌抑制不足，则应重点检查胆盐和结晶紫选择性体系是否有效。

典型结果与判读要点

大肠埃希氏菌等乳糖发酵菌在麦康凯琼脂上通常形成粉红色至红色菌落，有时周围伴有胆酸盐沉淀。这是由于乳糖发酵产酸，使中性红显色，并可能促使胆酸盐在菌落周围沉淀。

志贺氏菌多数不发酵乳糖，或发酵能力很弱，因此在麦康凯琼脂上通常表现为无色、浅色或轻微粉红色的半透明菌落，菌落多为圆形、光滑、湿润。原资料中“半透明棕色或绿色菌落”的表述不宜作为典型特征，发布时建议修正为“无色至浅粉红色、半透明、光滑湿润菌落”。

需要注意的是，麦康凯琼脂上的菌落颜色只能作为初筛依据。部分非目标肠杆菌也可能形成相似菌落，部分目标菌株也可能因受损、培养时间或代谢差异表现不典型。因此，在志贺氏菌、致泻大肠埃希氏菌或产志贺毒素大肠埃希氏菌检测中，应按照标准流程进行后续确认，不应仅凭麦康凯平板菌落颜色作出最终判定。

使用中的常见问题

如果乳糖发酵菌显色不明显，应检查培养基pH、中性红状态、灭菌是否过度、培养时间是否不足以及平板是否保存过久。若平板颜色过深、沉淀明显或选择性下降，可能与过度加热、干粉吸潮或储存不当有关。

若志贺氏菌生长不良，除培养基本身外，还应关注样品处理、增菌条件、菌株状态和接种量。志贺氏菌对不利环境较敏感，过强选择性、平板过干或培养条件偏差都可能影响回收。

若金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌生长明显，说明培养基选择性不足，应检查胆盐、结晶紫浓度和培养基制备过程。麦康凯琼脂的选择性需要与促生长能力保持平衡：选择性过弱会造成背景菌干扰，选择性过强则可能影响目标菌回收。

应用边界

麦康凯琼脂适合肠道革兰氏阴性菌的选择性分离和乳糖发酵初步鉴别，但不能替代专用显色培养基、选择性增菌液或确证试验。用于食品中志贺氏菌、致泻大肠埃希氏菌或产志贺毒素大肠埃希氏菌检测时，应严格按照相应GB标准规定的样品处理、增菌、分离、挑取和确认程序执行。

不同项目的目标菌不同，后续鉴定要求也不同。例如，志贺氏菌需要结合生化反应、血清学或其他确认方法；致泻大肠埃希氏菌和产志贺毒素大肠埃希氏菌通常还涉及毒力基因、血清型或特定确认流程。麦康凯琼脂只是分离筛选环节的一部分。

总结

麦康凯琼脂培养基（MacConkey Agar）是一种经典的选择性鉴别培养基，主要通过胆盐和结晶紫抑制多数革兰氏阳性菌，通过乳糖和中性红区分乳糖发酵菌与非乳糖发酵菌。大肠埃希氏菌通常形成粉红色至红色菌落，可伴有胆酸盐沉淀；志贺氏菌通常形成无色至浅色、半透明菌落。

本产品质量控制中，大肠埃希氏菌 ATCC 25922 和福氏志贺氏菌 CMCC(B)51572 应达到 PR≥0.5，金黄色葡萄球菌 ATCC 6538 应受到明显抑制。只有在配方、pH、灭菌、无菌性、促生长能力和选择性均受控的情况下，麦康凯琼脂才能在食品微生物检验中发挥可靠的分离筛选作用。