GB/T 13092-2025《饲料中霉菌总数的测定》主要变化解读

GB/T 13092《饲料中霉菌总数的测定》是饲料微生物检测中用于评价霉菌污染水平的重要方法标准。霉菌污染不仅会影响饲料感官品质和贮藏稳定性，还可能与霉菌毒素风险相关，因此在饲料原料、饲料添加剂和配合饲料质量控制中具有重要意义。GB/T 13092-2025 已于2026年5月1日实施，并全部代替 GB/T 13092-2006。与旧版相比，新版标准在稀释液选择、样品处理、计数培养基和培养条件等方面均进行了调整，更加适应不同类型饲料样品的检测需求。

一、稀释液选择更加灵活

2006版标准中使用的稀释液主要为0.85%生理盐水。新版标准中，稀释液可选择磷酸盐缓冲液或0.85%生理盐水。这个变化看似简单，但对实际检测有较大意义。

饲料样品类型复杂，既包括谷物、饼粕、牧草粉、配合饲料，也包括部分酸性、碱性或含缓冲能力较强的特殊原料。0.85%生理盐水主要作用是维持渗透压，对pH缓冲能力较弱；磷酸盐缓冲液则可在一定程度上维持样品悬液接近中性，减少样品酸碱性对霉菌孢子存活和萌发的影响。因此，对于pH偏离较明显或基质复杂的样品，磷酸盐缓冲液有助于提高检测稳定性和结果可比性。

二、样品处理方式更加适配不同基质

2006版方法中，样品通常需要先粉碎，再加入稀释液中振荡30 min。新版标准对样品处理方式进行了优化：对于非油脂类样品，可采用均质1 min～2 min，或继续采用振荡30 min的方式处理。这样既保留了传统振荡法，也为实验室使用均质设备提供了更高效的选择。

均质处理的优势在于可在较短时间内使样品与稀释液充分混合，提高霉菌孢子从样品颗粒表面释放的效率；振荡法则操作简单，适合设备条件有限或样品结构不宜强烈均质的场景。实验室应根据样品类型、设备条件和方法验证结果选择适合的处理方式。

新版标准还增加了油脂类样品的处理方法。油脂类饲料或高脂肪原料难以直接与水性稀释液混匀，若处理不充分，霉菌孢子可能被包裹在油脂中，导致计数偏低。新版方法通过无菌液体石蜡和吐温80辅助处理，并在42℃±2℃条件下振荡和乳化，有助于促进油脂溶解、分散和样品均匀化。42℃的处理温度既有利于油脂流动和乳化，又通常不会对霉菌孢子造成明显热损伤，是兼顾样品处理效率和微生物存活的折中条件。

三、计数培养基由高盐察氏琼脂调整为DRBC琼脂

新版标准最重要的变化之一，是计数培养基由2006版的高盐察氏琼脂调整为氯硝胺孟加拉红氯霉素琼脂，即DRBC琼脂。

高盐察氏琼脂营养较低，除蔗糖外主要由无机盐组成，培养基选择性较强，杂菌生长较少，但部分霉菌在其上生长较慢、菌落较小，甚至在规定时间内不能充分形成可计数菌落。对于霉菌污染水平较低或样品中霉菌种类复杂的饲料，高盐察氏琼脂可能导致部分霉菌回收不足，从而使计数结果偏低。

DRBC琼脂则更适合霉菌计数。其营养体系以有机营养和可利用碳源为基础，通常含有蛋白胨、葡萄糖等成分，可促进霉菌较快生长；氯霉素主要用于抑制细菌；孟加拉红可限制霉菌菌落过度扩散，使菌落边界更清楚；氯硝胺可进一步抑制快速扩展型霉菌的蔓延，减少菌落融合。与高盐察氏琼脂相比，DRBC琼脂更有利于提高霉菌回收率、缩短培养周期，并改善计数可读性。

需要注意的是，培养基变化可能导致检测结果与旧版方法不完全一致。由于DRBC琼脂对部分霉菌的促生长能力更好，新版方法得到的霉菌总数可能高于旧版方法。企业在标准切换时，应避免将新旧方法数据简单横向比较，必要时应通过过渡期比对建立新的趋势判断基础。

四、培养条件缩短，结果获得更快

2006版由于采用高盐察氏琼脂，霉菌生长较慢，通常在25℃～28℃范围内培养，第3天后开始逐日观察，并持续至约1周。新版标准采用DRBC琼脂后，霉菌生长速度相对提高，培养条件调整为28℃±1℃，同样从第3天开始逐日观察，但培养至第5天即可。

培养周期由约7天缩短至5天，有利于提高实验室检测效率，也便于企业更快获得饲料原料或成品的质量结果。对于饲料企业而言，这一变化可缩短原料验收、库存放行和质量风险判断时间。但培养周期缩短并不意味着可以提前随意报告结果，实验室仍应按照标准规定的观察时间和计数要求执行。

五、新版变化对实验室的影响

GB/T 13092-2025实施后，实验室应重点完成几项准备工作。首先，应更新SOP、原始记录表和报告模板，明确稀释液、样品处理方式、培养基、培养温度和观察时间的变化。其次，应核对培养基库存，避免继续按旧版方法使用高盐察氏琼脂作为新版标准下的计数培养基。第三，应对DRBC琼脂进行质量控制，包括无菌性、促生长能力、选择性和典型菌落表现。第四，对于油脂类样品，应准备无菌液体石蜡、吐温80以及满足42℃±2℃处理条件的设备，并对操作人员进行培训。

对于已经建立历史趋势数据库的企业，还应关注方法切换对检测结果的影响。培养基从高盐察氏琼脂更换为DRBC琼脂后，霉菌检出率和菌落数可能发生变化。企业应结合过渡期比对数据，重新评估内部警戒限、纠偏限或原料验收标准，避免因方法变化造成误判。

六、饲料霉菌总数检测的意义

饲料中霉菌总数反映的是在规定条件下可培养霉菌的数量，是评价饲料卫生质量和贮藏风险的重要指标。霉菌总数升高通常提示原料受潮、贮存条件不良、加工过程控制不足或仓储环境存在污染风险。

但霉菌总数不等同于霉菌毒素含量。霉菌数量高并不一定代表毒素一定超标，霉菌数量低也不能完全排除霉菌毒素风险，因为毒素可能在霉菌死亡后仍然残留。因此，霉菌总数检测应与水分、温湿度控制、感官检查、仓储管理和霉菌毒素检测结合使用，才能更全面地评价饲料安全。

总结

GB/T 13092-2025《饲料中霉菌总数的测定》相较2006版，在方法适用性和检测效率上都有明显提升。新版允许使用磷酸盐缓冲液或0.85%生理盐水作为稀释液，优化了非油脂类和油脂类样品处理方式，将计数培养基由高盐察氏琼脂调整为DRBC琼脂，并将培养周期缩短至5天。

这些变化有助于提高霉菌回收率、改善菌落计数效果、缩短检测时间，并更好地适应不同饲料基质。对于饲料生产企业、检测机构和培养基生产企业而言，标准切换不仅是文件编号更新，更涉及培养基采购、样品处理、质控验证、人员培训和历史数据解释。只有充分理解新版标准变化，并做好方法确认和质量控制，才能保证饲料中霉菌总数检测结果准确、稳定、可比。