改良 EC 肉汤（mEC+n）：大肠埃希氏菌 O157:H7/NM 的选择性增菌培养基

产品基本信息

配方组成、用量、作用及用途

检验原理

mEC+n 的选择性主要来自 3号胆盐和新生霉素。胆盐可抑制部分革兰氏阳性菌及对胆盐敏感的杂菌，而大肠埃希氏菌属于肠杆菌科，通常对一定浓度胆盐具有耐受性。新生霉素可进一步抑制部分革兰氏阳性菌及食品中常见背景菌，从而降低杂菌竞争压力。

培养基中的胰蛋白胨为 O157:H7/NM 提供氨基酸、短肽和氮源，乳糖作为碳源支持其生长。磷酸氢二钾和磷酸二氢钾组成缓冲体系，防止培养过程中 pH 过度波动。氯化钠维持渗透压，使细胞处于相对稳定的生理环境中。

需要注意的是，mEC+n 是选择性增菌培养基，不是最终鉴定培养基。增菌后仍需转接至适用于 O157 的选择性分离培养基，如 CT-SMAC、改良山梨醇麦康凯琼脂或其他标准方法规定的培养基，并结合生化鉴定、血清学试验或分子方法进行确证。

使用方法

称取本品 36.6 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装后于 121℃高压灭菌 15 min。灭菌后冷却至约 50℃，按每 225 mL 培养基加入 1 支配套试剂 TJ002，即 4.5 mg 无菌新生霉素，充分混匀后备用。

新生霉素为选择性添加剂，不宜随基础培养基一起高压灭菌。加入时培养基温度不宜过高，以免影响活性；温度也不宜过低，以免混合不均或培养基状态不稳定。加入配套试剂后应充分混匀，并按照实验室验证条件保存和使用。

典型应用

mEC+n 主要用于食品、环境及相关样品中大肠埃希氏菌 O157:H7/NM 的选择性增菌。样品经前处理后接种于 mEC+n 中培养，使低水平目标菌增殖，同时抑制部分背景菌。增菌液随后转接至 O157 选择性分离平板进行疑似菌落筛选。

典型 O157:H7 在山梨醇麦康凯类培养基上通常表现为不发酵山梨醇的无色或灰白色菌落，而多数普通大肠埃希氏菌可发酵山梨醇形成粉红色菌落。但仅凭菌落颜色不能作最终判断，疑似菌落仍需进一步确证。

质量控制

下列质控菌株接种后，于 36℃培养 24 h，观察增菌效果和选择性表现。

原资料中“在 Baird-Parker 上 ＞10 CFU，菌落黑色凸起，周围有混浊带和透明圈”的描述更符合金黄色葡萄球菌在 Baird-Parker 琼脂上的典型特征，不适合作为大肠埃希氏菌 O157:H7 的质控判读标准。对于 mEC+n 的质量控制，建议以产品随货说明书、企业内控标准或相应 O157 检测标准中规定的后续分离培养基和菌落特征为准。

若 O157:H7 生长率偏低，应检查培养基称量、灭菌条件、pH、新生霉素加入温度和剂量、菌株活性、接种量及培养温度。若粪肠球菌生长明显，则可能提示胆盐或新生霉素选择性不足、添加剂失效、配制错误或储存条件不当。

使用注意事项

mEC+n 为选择性增菌培养基，不能直接用于最终鉴定，也不能仅凭增菌液浑浊判断 O157:H7/NM 阳性。增菌后应按相应标准方法转接至选择性分离培养基，并结合确证试验完成结果判定。

干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，避免吸潮、结块或成分降解。新生霉素配套试剂应按说明保存，加入后不应再次高压灭菌。配制后的培养基若出现污染、异常沉淀、颜色异常或容器破损，不宜用于正式检测。

总体而言，改良 EC 肉汤（mEC+n）通过胰蛋白胨营养支持、胆盐选择性抑菌、磷酸盐缓冲以及新生霉素增强选择性的组合设计，适用于大肠埃希氏菌 O157:H7/NM 的选择性增菌。它在 O157 检测流程中主要承担提高目标菌数量、降低背景菌干扰和衔接后续分离确证的重要作用。