甘露醇卵黄多黏菌素（MYP）琼脂基础：蜡样芽孢杆菌选择性分离培养基

产品基本信息

配方组成、用量、作用及用途

检验原理

MYP 琼脂的选择性主要来自多黏菌素 B。多黏菌素 B 对许多革兰氏阴性菌具有抑制作用，可减少大肠埃希氏菌等背景菌干扰。蜡样芽孢杆菌为革兰氏阳性芽孢杆菌，对该选择性条件相对耐受，因此可在培养基上形成菌落。

MYP 的鉴别性主要来自两套反应。第一是甘露醇发酵反应：培养基中含有甘露醇和酚红，若细菌发酵甘露醇产酸，酚红会由红色转为黄色，菌落及周围培养基出现黄变。典型蜡样芽孢杆菌通常不发酵甘露醇，因此菌落多呈粉红色至微粉红色，而不是黄色。

第二是卵黄反应：卵黄中含有卵磷脂等成分，蜡样芽孢杆菌常可产生卵磷脂酶，使菌落周围形成粉红色或淡粉红色沉淀环。这一沉淀环是 MYP 上筛选疑似蜡样芽孢杆菌的重要特征之一。

因此，典型蜡样芽孢杆菌在 MYP 琼脂上通常表现为粉红色至微粉红色菌落，周围有淡粉红色沉淀环。但部分其他芽孢杆菌也可能出现相似表现，因此疑似菌落仍需结合显微镜检查、生化试验、溶血试验或标准方法要求的确证步骤进行判断。

使用方法

称取本品 46.0 g，加入蒸馏水或去离子水 950 mL，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装后于 121℃高压灭菌 15 min。灭菌后冷却至约 50℃，每 95 mL 基础培养基以无菌操作加入配套试剂 TJ019 和 TJ026 各 1 支，摇匀后倾注平板备用。

卵黄和多黏菌素 B 配套试剂不宜随基础培养基一起高压灭菌。加入时培养基温度应控制在约 50℃，温度过高可能影响卵黄反应表现或抗生素活性，温度过低则容易导致琼脂凝固和添加剂分布不均。加入后应充分混匀，但避免剧烈振摇产生大量气泡。

典型菌落特征

在 30±2℃培养 24～48 h 后，典型蜡样芽孢杆菌在 MYP 琼脂上通常形成微粉红色或粉红色菌落，周围有淡粉红色沉淀环。甘露醇发酵阳性的细菌可形成黄色菌落或使周围培养基变黄，通常不作为典型蜡样芽孢杆菌表现。

MYP 平板的结果应综合菌落颜色、沉淀环、培养时间和后续试验判断。仅凭粉红色菌落或沉淀环不能直接确认蜡样芽孢杆菌阳性。

质量控制

下列质控菌株接种后，于 30±2℃培养 24～48 h，观察生长、特异性和选择性表现。

蜡样芽孢杆菌应生长良好，并表现出典型粉红色菌落和沉淀环，说明培养基促生长能力和卵黄反应正常。枯草芽孢杆菌形成黄色菌落且无沉淀环，说明甘露醇发酵鉴别系统有效。大肠埃希氏菌应受到明显抑制，说明多黏菌素 B 选择性符合要求。

若蜡样芽孢杆菌生长率不足或沉淀环不明显，应检查培养基称量、溶解、灭菌条件、pH、卵黄试剂质量、多黏菌素 B 活性、添加温度、平板储存状态、菌株活性和培养时间。若大肠埃希氏菌生长明显，则可能提示多黏菌素 B 添加不足、试剂失效或配制操作不当。

使用注意事项

MYP 琼脂基础必须加入卵黄和多黏菌素 B 配套试剂后使用。加入配套试剂后的培养基不应再次高压灭菌，也不宜长时间高温放置。制备好的平板应颜色均匀、表面平整，无污染、干裂、大量析水或异常沉淀。

判读时应注意，典型蜡样芽孢杆菌通常为粉红色至微粉红色菌落并伴沉淀环；若出现黄色菌落，多提示甘露醇发酵阳性菌，并不符合典型蜡样芽孢杆菌表现。对于疑似菌落，应按 GB、SN 或实验室标准方法进行后续纯化和确证。

干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，避免吸潮、结块或成分变化。卵黄和多黏菌素 B 配套试剂应按说明保存和使用，避免因试剂失效影响选择性和鉴别结果。

总体而言，甘露醇卵黄多黏菌素（MYP）琼脂基础通过营养支持、多黏菌素 B 选择性抑菌、甘露醇发酵鉴别和卵黄反应鉴别相结合，可用于蜡样芽孢杆菌的选择性分离培养，是食品微生物检测中筛选蜡样芽孢杆菌的重要培养基之一。